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大鼠elisa檢測(cè)試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反響的完結(jié)需求有一定的溫度和時(shí)刻，這一保溫進(jìn)程稱(chēng)為溫育，有人稱(chēng)之為孵育，在大鼠elisa檢測(cè)試劑盒中似不恰當(dāng)。
1、為什么ELISA反響總是需求一定時(shí)刻的溫育？
ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結(jié)合的時(shí)機(jī)，只有*貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的進(jìn)程，因而需經(jīng)擴(kuò)散才能到達(dá)反響的結(jié)尾。在這以后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。
2、溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。
37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的適宜溫度。在建立ELISA方法作反響動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經(jīng)1～2小時(shí)，產(chǎn)品的生成可達(dá)高峰。為加快反響，可進(jìn)步反響的溫度，有些實(shí)驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜選用更高的溫度?？乖贵w反響4℃更為穩(wěn)定，在放射免疫測(cè)定中多使反響在冰箱中過(guò)夜，以構(gòu)成最多的沉淀。但因所需時(shí)刻太長(zhǎng)，在大鼠elisa檢測(cè)試劑盒中一般不予選用。
大鼠elisa檢測(cè)試劑盒保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均選用水浴，可將大鼠elisa檢測(cè)試劑盒板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度敏捷平衡。為防止蒸騰，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時(shí)可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱，大鼠elisa檢測(cè)試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的資料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)則的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。
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